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  • 3-磷酸甘油醛脫氫酶活性檢測試劑盒 微量法
  • 3-磷酸甘油醛脫氫酶活性檢測試劑盒 微量法
產(chǎn)品名稱：

3-磷酸甘油醛脫氫酶活性檢測試劑盒 微量法
產(chǎn)品品牌： SOLARBIO/索萊寶 價(jià)格：
廠商性質(zhì)： 生產(chǎn)廠家 產(chǎn)品時間： 2024-04-11
儲存條件
-20℃
中文名稱
3-磷酸甘油醛脫氫酶活性檢測試劑盒 微量法
有效期
6個月
單位
盒
推薦
若使用96孔板測定，需使用96孔UV板，推薦貨號YA0602
英文名稱
Glyceraldehyde-3-phosphate Dehydrogenase(GAPDH) Activity Assay Kit
別名
3-磷酸甘油醛脫氫酶試劑盒 GAPDH Kit 3-磷酸甘油醛脫氫酶(GAP

產(chǎn)品概述

品牌SOLARBIO/索萊寶CAS詳詢
分子式詳詢純度詳詢
分子量詳詢貨號BC2215
規(guī)格100T/96S供貨周期現(xiàn)貨
主要用途測定意義：GAPDH催化3-磷酸甘油醛氧化生成1,3-二磷酸甘油酸,是糖酵解途徑應(yīng)用領(lǐng)域環(huán)保,化工,生物產(chǎn)業(yè),農(nóng)林牧漁,綜合


3-磷酸甘油醛脫氫酶（GAPDH）活性檢測試劑盒說明書
微量法
貨號: BC2215
規(guī)格:100T/96S
產(chǎn)品組成：使用前請認(rèn)真核對試劑體積與瓶內(nèi)體積是否一致，有疑問請及時聯(lián)系索萊寶工作人員。
試劑名稱規(guī)格保存條件
提取液液體100 mL×1瓶2-8℃保存
試劑一粉劑×1瓶-20℃保存
試劑二液體20 mL×1瓶2-8℃保存
試劑三液體12 µL×1瓶2-8℃保存
溶液的配制：

  1. 試劑三：液體置于試劑瓶內(nèi)EP管中。根據(jù)用量按照試劑三:蒸餾水為3:100的體積比例充分混勻，現(xiàn)用現(xiàn)配；

  2. 工作液的配制：將試劑二全部倒入試劑一瓶中，充分溶解，根據(jù)需要取一定的量37℃（哺乳動物）或25℃（其它物種）預(yù)熱10min；用不完的試劑分裝后-20℃保存，禁止反復(fù)凍融。

產(chǎn)品說明：
GAPDH（EC1.2.1.12）催化3-磷酸甘油醛氧化生成1,3-二磷酸甘油酸，是糖酵解途徑的關(guān)鍵酶，與糖異生途徑、體內(nèi)血糖濃度的維持和糖尿病的發(fā)生密切相關(guān)，在機(jī)體糖、脂、蛋白代謝紊亂疾病中發(fā)揮重要作用。
3-磷酸甘油酸激酶催化三磷酸甘油酸和ATP生成1,3-二磷酸甘油酸。GAPDH逆向催化1,3-二磷酸甘油酸和NADH生成3-磷酸甘油醛、無機(jī)磷和NAD+，340nm處測定NADH的減少量可反映GAPDH活性的高低。
注意：實(shí)驗(yàn)之前建議選擇2-3個預(yù)期差異大的樣本做預(yù)實(shí)驗(yàn)。如果樣本吸光值不在測量范圍內(nèi)建議稀釋或者增加樣本量進(jìn)行檢測。
需自備的儀器和用品：
紫外分光光度計(jì)/酶標(biāo)儀、低溫離心機(jī)、水浴鍋、微量石英比色皿/96孔UV板、可調(diào)式移液槍、研缽/勻漿器、冰和蒸餾水。
操作步驟：具體操作步驟詳見“產(chǎn)品資料"附件
注意事項(xiàng)：

  1. 當(dāng)A1小于0.8或ΔA大于0.7時（96孔板為A1小于0.4或ΔA大于0.4），建議將樣本稀釋后再進(jìn)行測定。

  2. 空白管為檢測各試劑組分質(zhì)量的檢測孔，正常情況下，變化不超過0.02。

實(shí)驗(yàn)實(shí)例：

  1. 取0.1g兔腎臟加入1mL提取液，進(jìn)行冰浴勻漿，然后8000g，4℃，離心20min，取上清置冰上，之后按照測定步驟操作，用微量石英比色皿測得計(jì)算ΔA測定管= A1測定-A2測定=0.9333-0.2289=0.7044，ΔA空白管=A1空白-A2空白=0.9322-0.9274=0.0048，ΔA=ΔA測定管-ΔA空白管=0.6996，按樣本質(zhì)量計(jì)算酶活得：

GAPDH酶活（U/g質(zhì)量）=1072×ΔA÷W=7499.7 U/g質(zhì)量。

  1. 取0.1g三葉草加入1mL提取液，進(jìn)行冰浴勻漿，然后8000g，4℃，離心20min，取上清置冰上，之后按照測定步驟操作，用微量石英比色皿測得計(jì)算ΔA測定管=A1測定-A2測定=1.0184-1.0042=0.0142，ΔA空白管=A1空白-A2空白=0.9322-0.9274=0.0048，ΔA=ΔA測定管-ΔA空白管=0.0094，按樣本質(zhì)量計(jì)算酶活得：

GAPDH酶活（U/g質(zhì)量）=1072×ΔA÷W=100.77 U/g質(zhì)量。

  1. 取兔血清直接檢測，用微量石英比色皿測得計(jì)算ΔA測定管=A1測定-A2測定=0.9528-0.9303=0.0225，ΔA空白管=A1空白-A2空白=0.9322-0.9274=0.0048，ΔA=ΔA測定管-ΔA空白管=0.0177，按血清（漿）體積計(jì)算酶活得：

GAPDH酶活（U/mL）=1072×ΔA=18.974 U/mL。
相關(guān)系列產(chǎn)品：
BC0990/BC0995 植物葉綠素含量檢測試劑盒
BC4330/BC4335 植物類胡蘿卜素含量檢測試盒
 

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