外切β-1,4-葡聚糖酶/纖維二糖水解酶（C1）活性檢測(cè)試劑盒說明書

可見分光光度法

貨號(hào)：BC4300

規(guī)格：50T/24S

產(chǎn)品組成：使用前請(qǐng)認(rèn)真核對(duì)試劑體積與瓶?jī)?nèi)體積是否一致，有疑問請(qǐng)及時(shí)聯(lián)系索萊寶工作人員。

溶液的配制：

1、 試劑一：臨用前取1瓶加入7 mL蒸餾水溶解備用，現(xiàn)用現(xiàn)配；用不完的試劑2-8℃保存4周；

2、 標(biāo)準(zhǔn)品：5 μmol/mL *溶液。

產(chǎn)品說明：

β-1,4-葡聚糖酶/纖維二糖水解酶（C1，EC3.2.1.91）存在于細(xì)菌、真菌和動(dòng)物體內(nèi)，是微生物纖維素降解酶系的主要組分，也是水解天然纖維素的必需組分，C1酶作用于纖維素線狀分子的末端，水解β-葡萄糖苷鍵，每次切下1個(gè)纖維二糖分子。C1能夠催化對(duì)硝 基苯纖維二糖苷 （PNPC）生成對(duì)硝 基苯*，后者在400 nm有特征光吸收。

注意：實(shí)驗(yàn)之前建議選擇2-3個(gè)預(yù)期差異大的樣本做預(yù)實(shí)驗(yàn)。如果樣本吸光值不在測(cè)量范圍內(nèi)建議稀釋或者增加樣本量進(jìn)行檢測(cè)。

需自備的儀器和用品：

可見分光光度計(jì)、天平、低溫離心機(jī)、水浴鍋/恒溫培養(yǎng)箱、1 mL玻璃比色皿、可調(diào)式移液槍、研缽/勻漿器、EP管和蒸餾水。

操作步驟：具體操作步驟請(qǐng)查看產(chǎn)品附件

注意事項(xiàng)：

1、若吸光度大于1時(shí)，建議將樣本用提取液稀釋后進(jìn)行測(cè)定。計(jì)算公式乘以稀釋倍數(shù)。

實(shí)驗(yàn)實(shí)例：

1、 取0.1g金針菇進(jìn)行樣本處理，離心取上清稀釋5倍后按照測(cè)定步驟操作，測(cè)得計(jì)算ΔA測(cè)定=A測(cè)定管-A對(duì)照管=0.531-0.006=0.525，ΔA標(biāo)準(zhǔn)=A標(biāo)準(zhǔn)管-A空白管=0.305，根據(jù)樣本質(zhì)量計(jì)算酶活得：

C1（U/g 質(zhì)量）=250×ΔA測(cè)定÷ΔA標(biāo)準(zhǔn)÷W×5（稀釋倍數(shù)）=250×0.525÷0.305÷0.1×5=21516.4 U/g 質(zhì)量。

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