土壤銨態(tài)氮含量檢測(cè)試劑盒說明書

可見分光光度法

貨號(hào)：BC1510

規(guī)格：50T/48S

產(chǎn)品組成：使用前請(qǐng)認(rèn)真核對(duì)試劑體積與瓶?jī)?nèi)體積是否一致，有疑問請(qǐng)及時(shí)聯(lián)系索萊寶工作人員。

溶液的配制：

1、 試劑一：臨用前將試劑一A加入試劑一B中混勻備用，或按比例現(xiàn)用現(xiàn)配；避光2-8℃可保存2周。若變色則不能繼續(xù)使用。

2、 標(biāo)準(zhǔn)品：100 μg/mL NH₄⁺-N標(biāo)準(zhǔn)液。

產(chǎn)品說明：

土壤銨態(tài)氮是土壤速效氮的重要組成部分，可以被植物直接吸收利用。銨態(tài)氮指標(biāo)對(duì)農(nóng)業(yè)生產(chǎn)具有極其重要的作用。

在強(qiáng)堿介質(zhì)中，土壤中的銨態(tài)氮與次氯酸鹽和*酚作用，生成靛酚藍(lán)染料，在630nm處有特征吸收峰，吸光值與銨態(tài)氮含量成正比。

技術(shù)指標(biāo)：

低檢出限：0.0646 μg/mL

線性范圍：0.156-5 μg/mL

注意：實(shí)驗(yàn)之前建議選擇2-3個(gè)預(yù)期差異大的樣本做預(yù)實(shí)驗(yàn)。如果樣本吸光值不在測(cè)量范圍內(nèi)建議稀釋或者增加樣本量進(jìn)行檢測(cè)。

需自備的儀器和用品：

可見分光光度計(jì)、天平、臺(tái)式離心機(jī)、1mL玻璃比色皿、振蕩器、30~50目篩、研缽、恒溫水浴鍋。

操作步驟：

一、樣本處理（可適當(dāng)調(diào)整待測(cè)樣本量，具體比例可以參考文獻(xiàn)）

按照土樣質(zhì)量（g）：提取液體積（mL）為 1：5~10的比例（建議稱取約0.1g新鮮土樣，加入1mL提取液），振蕩提取1h，10000g，25℃離心10min，取上清液待測(cè)。（土樣要求參考注意事項(xiàng)1.2.）

二、測(cè)定步驟

1. 可見分光光度計(jì)預(yù)熱30min，波長(zhǎng)調(diào)至630nm，蒸餾水調(diào)零。

2. 標(biāo)準(zhǔn)液稀釋：臨用前取20μL 100μg/mL氮標(biāo)準(zhǔn)液，加入780μL蒸餾水，充分混勻，配制成2.5μg/mL標(biāo)準(zhǔn)液使用，現(xiàn)用現(xiàn)配。（實(shí)驗(yàn)中每管需要400μL，為減小實(shí)驗(yàn)誤差，故配制大體積。）

3. 加樣表：

三、計(jì)算公式

NH₄⁺-N（μg/g 土樣）=ΔA測(cè)定÷ΔA標(biāo)準(zhǔn)×C標(biāo)準(zhǔn)液×V提取÷W=2.5×ΔA測(cè)定÷ΔA標(biāo)準(zhǔn)÷W

C標(biāo)準(zhǔn)液：標(biāo)準(zhǔn)液濃度，2.5μg/mL；V提?。禾崛∫后w積，1mL；W：樣本質(zhì)量，g。

注意事項(xiàng)：

1、 土壤經(jīng)風(fēng)干或者烘干很容易引起銨態(tài)氮含量的變化，所以建議采用新鮮土壤進(jìn)行測(cè)定。樣品采集后應(yīng)于4℃下密封運(yùn)輸和保存，并在3d內(nèi)分析完畢。否則，應(yīng)于-20℃（深度冷凍）下以小塊、小份保存，樣品中氨氮可以保存數(shù)周。當(dāng)測(cè)定深度冷凍氨氮含量時(shí)，應(yīng)控制解凍的溫度和時(shí)間。室溫環(huán)境下解凍時(shí)，需在4 h內(nèi)完成樣品解凍、勻質(zhì)化和提??；如果在4℃下解凍，解凍時(shí)間不應(yīng)超過48 h。

2、 如果要比較不同樣本間的銨態(tài)氮含量，需將土樣烘干，按干重計(jì)算后再進(jìn)行比較。

3、 如果樣本吸光值大于0.7，建議將樣本用提取液稀釋后進(jìn)行測(cè)定。

實(shí)驗(yàn)實(shí)例：

1、 取0.1g三葉草土加入1mL提取液震蕩提取1h離心，取上清之后按照測(cè)定步驟操作，測(cè)得計(jì)算ΔA測(cè)定管=A測(cè)定管-A空白管=0.165-0.02=0.145，ΔA標(biāo)準(zhǔn)=A標(biāo)準(zhǔn)管-A空白管=0.37-0.02=0.35，按樣本質(zhì)量計(jì)算含量得：

NH₄⁺-N（μg/g 土樣）=2.5×ΔA測(cè)定÷ΔA標(biāo)準(zhǔn)÷W=2.5×0.145÷0.35÷0.1=10.36 μg/g 土樣。

2、 取0.1g林土加入1mL提取液震蕩提取1h離心，取上清之后按照測(cè)定步驟操作，測(cè)得計(jì)算ΔA測(cè)定管=A測(cè)定管-A空白管=0.145-0.02=0.125，ΔA標(biāo)準(zhǔn)=A標(biāo)準(zhǔn)管-A空白管=0.37-0.02=0.35，按樣本質(zhì)量計(jì)算含量得：

NH₄⁺-N（μg/g 土樣）=2.5×ΔA測(cè)定÷ΔA標(biāo)準(zhǔn)÷W=2.5×0.125÷0.35÷0.1=8.93 μg/g 土樣。

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