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| 品牌 | SOLARBIO/索萊寶 | CAS | 詳詢 |
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| 分子式 | 詳詢 | 純度 | 詳詢 |
| 分子量 | 詳詢 | 貨號 | BC5175 |
| 規(guī)格 | 100T/96S | 供貨周期 | 現(xiàn)貨 |
| 主要用途 | 直接膽*素（DBIL）含量檢測 | 應(yīng)用領(lǐng)域 | 環(huán)保,化工,生物產(chǎn)業(yè),農(nóng)林牧漁,綜合 |
直接膽*素（DBIL）含量檢測試劑盒說明書
微量法
貨號：BC5175
規(guī)格：100T/96S
產(chǎn)品內(nèi)容：使用前請認真核對試劑體積與瓶內(nèi)體積是否一致，有疑問請及時聯(lián)系索萊寶工作人員。
試劑名稱 | 規(guī)格 | 保存條件 |
試劑一 | 液體25mL×1瓶 | 2-8℃保存 |
試劑二 | 液體6mL×1瓶 | 2-8℃保存 |
產(chǎn)品說明：
直接膽*素（Direct bilirubin，DBil）又稱結(jié)合膽*，是由間接膽紅*進入肝后受肝內(nèi)葡萄糖醛酸基轉(zhuǎn)移酶的作用與葡萄糖醛酸結(jié)合生成的。直接膽*素增高對臨床診斷阻塞性黃疸、肝細胞性黃疸、肝癌、胰頭癌、膽石癥、膽管癌等有重要意義。直接膽*素能被亞*鈉氧化，生成膽綠素。通過檢測450nm下波長變化，可計算出直接膽*素的含量。
注意：實驗之前建議選擇2-3個預(yù)期差異大的樣本做預(yù)實驗。如果樣本吸光值不在測量范圍內(nèi)建議稀釋或者增加樣本量進行檢測。
需自備的儀器和用品：
可見分光光度計/酶標儀、低溫離心機、水浴鍋/恒溫培養(yǎng)箱、可調(diào)式移液器、微量玻璃比色皿/96孔板、冰和蒸餾水。
操作步驟：
一、樣本處理（可適當調(diào)整待測樣本量，具體比例可以參考文獻）
血清、血漿等液體樣本：直接測定。若溶液渾濁，可以離心后取上清進行測定。
二、測定步驟
1、 分光光度計/酶標儀預(yù)熱30min以上，調(diào)節(jié)波長至450nm，分光光度計用蒸餾水調(diào)零。
2、 按下表步驟加樣：（96孔板或者EP管中加入下列試劑）
試劑名稱（μL） | 測定管 | 空白管 |
樣本 | 8 | |
蒸餾水 | 8 | |
試劑一 | 192 | 192 |
充分混勻，置于37℃水浴鍋/恒溫培養(yǎng)箱中孵育5min，測定450nm處吸光度A，分別記為A1測定、A1空白 | ||
試劑二 | 48 | 48 |
充分混勻，置于37℃水浴鍋/恒溫培養(yǎng)箱中準確反應(yīng)5min，測定450nm處吸光度A，分別記為A2測定、A2空白；計算ΔA測定=A1測定-A2測定；ΔA空白=A1空白-A2空白。空白管只需測1-2次。（使用比色皿反應(yīng)時，第一步5min反應(yīng)完成將液體倒入比色皿比色后，可直接在比色皿中加入試劑二混合均勻反應(yīng)5min直接進行測定；使用96孔板反應(yīng)時，可以將上述試劑直接加入96孔板中反應(yīng)第一步的5min，之后直接加入試劑二進行第二步反應(yīng)） | ||
三、DBIL含量計算
1、 計算公式
（1）使用96孔板：
DBIL含量（μmol/L）=1495.7×（ΔA測定-ΔA空白）-15.343
（2）使用微量比色皿：
DBIL含量（μmol/L）=1099.7×（ΔA測定-ΔA空白）-10.73
注意事項：
1、膽*素見光易分解，測定時要盡量避光。
2、如果ΔA＜0或過低，建議增加樣本量后再進行測定；如果ΔA＞0.5，建議稀釋樣本后再進行測定。
實驗實例：
1、 取非正常小鼠血清按照測定步驟操作，用96孔板測得計算ΔA測定=A1測定-A2測定=0.217-0.170=0.047，ΔA空白=A1空白-A2空白=0.044-0.044=0，計算含量得：
DBIL（μmol/L）= 1495.7×（ΔA測定-ΔA空白）-15.343=54.95 μmol/L。
相關(guān)系列產(chǎn)品：
BC5180/BC5185 總膽*（TBIL）含量檢測試劑盒
直接膽*素（DBIL）含量檢測試劑盒 微量法 直接膽*素（DBIL）含量檢測試劑盒 微量法
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