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  • 土壤纖維素酶(S-CL)活性檢測試劑盒
產(chǎn)品名稱:

土壤纖維素酶(S-CL)活性檢測試劑盒

產(chǎn)品品牌: SOLARBIO/索萊寶 價格:
廠商性質(zhì): 生產(chǎn)廠家 產(chǎn)品時間: 2024-08-01
儲存條件
2-8℃
中文名稱
土壤纖維素酶(S-CL)活性檢測試劑盒
有效期
6個月
單位

英文名稱
Soil Cellulase(S-CL) Activity Assay Kit
檢測方法
微量法 Spectrophotometer/Microplate Reader
規(guī)格
100T/48S
自備試劑
該試劑盒實驗過程中需自備試劑,詳情見網(wǎng)站說明書

產(chǎn)品概述

品牌SOLARBIO/索萊寶CAS詳詢
分子式詳詢純度詳詢
分子量詳詢貨號BC0155
規(guī)格100T/48S供貨周期現(xiàn)貨
主要用途土壤纖維素酶(S-CL)檢測應(yīng)用領(lǐng)域環(huán)保,化工,生物產(chǎn)業(yè),農(nóng)林牧漁,綜合

土壤纖維素酶(S-CL)活性檢測試劑盒說明書
微量法
貨號:BC0155
規(guī)格:100T/48S
產(chǎn)品組成:使用前請認真核對試劑體積與瓶內(nèi)體積是否一致,有疑問請及時聯(lián)系索萊寶工作人員。
試劑名稱規(guī)格保存條件
試劑一液體2.5 mL×1瓶(自備)2-8℃保存
試劑二液體5 mL×1瓶2-8℃保存
試劑三液體20 mL×1瓶2-8℃保存
試劑四液體6 mL×1瓶2-8℃保存
標(biāo)準(zhǔn)品粉劑×12-8℃保存
溶液的配制:


產(chǎn)品說明:
S-CL主要來源于土壤微生物,S-CL催化農(nóng)作物秸稈產(chǎn)生的葡萄糖是主要的碳源營養(yǎng)物質(zhì)。本產(chǎn)品采用3,5-二硝基水楊酸法測定S-CL催化纖維素降解產(chǎn)生的還原糖的含量。




注意:實驗之前建議選擇2-3個預(yù)期差異大的樣本做預(yù)實驗。如果樣本吸光值不在測量范圍內(nèi)建議稀釋或者增加樣本量進行檢測。
需自備的儀器和用品
可見分光光度計/酶標(biāo)儀、水浴鍋、可調(diào)式移液器、微量玻璃比色皿/96孔板、30~50目篩、研缽、甲苯(不允許快遞)和蒸餾水。
操作步驟:
一、樣本處理(可適當(dāng)調(diào)整待測樣本量,具體比例可以參考文獻)
新鮮土樣自然風(fēng)干或37℃烘箱風(fēng)干,過30~50目篩。
二、測定步驟
  1. 分光光度計或酶標(biāo)儀預(yù)熱30min以上,調(diào)節(jié)波長至540nm,分光光度計蒸餾水調(diào)零。

  2. 標(biāo)準(zhǔn)品準(zhǔn)備:將標(biāo)準(zhǔn)品用蒸餾水稀釋至1、0.8、0.6、0.40.2、0.1mg/mL。

  3. 標(biāo)準(zhǔn)品稀釋表:

序號稀釋前濃度(mg/mL)標(biāo)準(zhǔn)液體積(µL)蒸餾水體積(µL)稀釋后濃度(mg/mL)
1101009001
21160400.8
31120800.6
41801200.4
51401600.2
61201800.1
試驗中每個標(biāo)準(zhǔn)管需15µL標(biāo)準(zhǔn)溶液
4、操作表(在EP管中依次加入下列試劑)

對照管測定管標(biāo)準(zhǔn)管空白管
風(fēng)干土樣(g)0.050.05--
試劑一(μL2525--

煮沸15min(蓋緊)振蕩混勻,室溫放置15min--
試劑二(μL4545--
試劑三(μL185185--
蒸餾水(μL4545--
振蕩混勻,40℃水浴糖化1h 后,煮沸15min(蓋緊,防止水分散失),10000rpm常溫離心10min,取上清得糖化液。--
糖化液(μL1515--
標(biāo)準(zhǔn)液(μL--15-
蒸餾水(μL---15
試劑四(μL35353535
混勻, 沸水浴中煮沸顯色15min(蓋緊,防止水分散失),冷卻
蒸餾水(μL250250250250
混勻,冷卻后,取200μL至微量玻璃比色皿或96孔板中,測定540nm下吸光值A,分別記為A對照管、A測定管、A標(biāo)準(zhǔn)管、A空白管。計算ΔA測定=A測定管-A對照管,ΔA標(biāo)準(zhǔn)=A標(biāo)準(zhǔn)管-A空白管。每個測定管設(shè)定一個對照管。空白管和標(biāo)準(zhǔn)曲線只需做1-2次。
三、S-CL酶活計算
1、標(biāo)準(zhǔn)曲線的建立:
標(biāo)準(zhǔn)溶液濃度(y)為縱坐標(biāo),吸光度ΔA標(biāo)準(zhǔn)(x)為橫坐標(biāo)建立標(biāo)準(zhǔn)曲線y=kx+b。根據(jù)標(biāo)準(zhǔn)曲線,將ΔA測定帶入公式中(x)計算樣本濃度ymg/mL)。
2、S-CL酶活計算:
單位的定義:每天每g土樣中產(chǎn)生1mg葡萄糖定義為一個酶活力單位。
S-CL酶活(U/g 土樣)=y×V反總÷W÷T =144×y
T:反應(yīng)時間,1h=1/24d;V反總:反應(yīng)體系總體積,0.3mL;W:樣本質(zhì)量,0.05g。
注意事項:
若樣本測定管吸光度過?。?.02),可延長反應(yīng)時間,即40℃水浴糖化時間,最后計算時加以換算即可。
參考文獻:
  1. Deng S P, Tabatabai M A. Cellulase activity of soils[J]. Soil Biology and Biochemistry, 1994, 26(10): 1347-1354.

  2. Sinegani A A S, Sinegani M S. The effects of carbonates removal on adsorption, immobilization and activity of cellulase in a calcareous soil[J]. Geoderma, 2012, 173: 145-151.

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土壤纖維素酶(S-CL)活性檢測試劑盒   



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